Clarity Oligo-RP

Колонки Clarity Oligo-RP специально разработаны для обращённо-фазовой очистки олигонуклеотидов с соблюдением баланса между гидрофобностью и полярной селективностью. Частицы сорбента выполнены по композитной TWIN™ технологии. Эта технология даёт лучшую селективность и эффективность при работе с олигонуклеотидами по сравнению с другими имеющимися на рынке гибридными и полимерными сорбентами или сорбентами на основе силикагеля. Колонки Clarity Oligo-RP выпускаются в широком диапазоне размеров с частицами сорбента 3, 5 и 10 мкм.

• Отделение до 90% ошибочных N-1 цепочек от целевого олигонуклеотида.
• Очистка не защищённых тритильной группой ДНК, РНК, тиоатов и модифицированных/меченных олигонуклеотидов.
• Препаративные колонки для загрузки > 5 мкмоль.
• Очистка олигонуклеотидов длиной до 60 оснований.
• Отличные колонки для задач контроля качества методом обращённо-фазовой ВЭЖХ.

Сорбент Oligo-RP специально разработан так, чтобы совместить все возможные способы нуклеотидов взаимодействовать друг с другом. Сорбент обладает гидрофобной, дипольной, п-п и водородной связью донорно-акцепторных участков. Благодаря этой комбинаций взаимодействий и ион-парному реагенту достигается высокий уровень избирательной селективности между нуклеиновыми кислотами. Oligo-RP может распознать даже незначительные изменения в цепочке нуклеотидов, например, разницу в одно основание (N и N-1) или замену одного основания другим.

Разделение ошибочной цепочки длины N-1 и целевой цепочки длины N

Образцы: 1. Цепочка РНК из 20 оснований: CUGUAAUCUCUUGUCUATT 2. Цепочка РНК из 21 основания: UCUGUAAUCUCUUGUCUATT

Разрешение примесей в цепочке ДНК из 60 оснований

Образец: Цепочка ДНК из 60 оснований: 5’-CTC CTG GGC CGT GGC TCT GCG CAC TTC AGG AAA CTG GGC ACT CCT GGG CAG TGG ATC TGC-3’ Номера пиков обозначают длину цепочки присутствующей примеси

Обращённо-фазовое разделение олигонуклеотидов имеет преимущество перед другими методами разделения, такими как ионный обмен. Фаза Oligo-RP предусматривает высокую нагрузочную способность и обеспечивает высокую степень восстановления и чистоты, устраняя необходимость в дополнительных стадиях очистки, таких как обессоливание. Так как обращенно-фазовая ВЭЖХ обладает чрезвычайно высоким разрешением, колонки Oligo-RP позволяют легко отделить целевой олигонуклеотид от многих примесей, таких как N-1 ошибочные цепочки. Кроме того, с помощью одной колонки можно разделять и ДНК, и РНК, и модифицированные олигонуклеотиды.

Препаративная очистка ДНК

	Колонка: Clarity Oligo-RP C18 3 мкм 50х10 мм (препаративная) 50х4.6 мм (аналитическая) Подвижная фаза: A: 50 мМ триэтиламмоний ацетат pH 7.5/5% ацетонитрил; B: метанол Градиент: с A/B (90:10) до A/B (40:60) за 20 мин Расход: 1 мл/мин Детектирование: УФ 260 нм Образец: цепочка ДНК из 20 оснований ACGTCATGTCGAGATCATCG
200 мкг (1 мкмоль) образца 20-мерной ДНК были загружены в препаративную колонку Clarity Oligo-RP с внутренним диаметром 10 мм. В результате примеси были удалены из целевой цепочки.
Для проверки качества препаративной очистки был проведён анализ на аналитической колонке. Подтверждена степень очистки 92% при выходе 85%.

Очистка меченных ДНК с различным содержание GC

Образцы: 1. FAM-меченная ДНК (25 оснований) GC: 72% 2. FAM-меченная ДНК (25 оснований) GC: 56% 3. FAM-меченная ДНК (25 оснований) GC: 20%

Информация для заказа