|
||
|
Свидетельство №43-08 от 20.03.2008
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Описание | Комплект оборудования | Свидетельство | Хроматограммы |
1. Объекты исследования
Настоящая методика устанавливает метод измерения массовой доли жирорастворимых витаминов A (ретинола и его сложноэфирных форм), Е (α-токоферола и его сложноэфирных форм) и D3 (холекальциферола) в пищевых продуктах (в том числе, в детском питании), продовольственном сырье, комбикормах, премиксах, БАД и витаминных концентратах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
2. Диапазон измерений
Диапазоны измерений массовой доли витаминов представлены в таблице.
| Наименование объекта |
Диапазон измерений массовой доли, мг/кг |
Показатель точности (границы относительной погрешности), ±δ, %, при Р=0,95 |
Показатель повторяемости (относительное среднеквадрати- ческое отклонение повторяемости), σr, % |
Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадрати- ческое отклонение воспроизводимости), σR , % |
Предел повторяемости, r, %, P=0,95, n=2 |
| Витамин А | от 0,2 до 9,0 вкл. | 20 | 6 | 9 | 17 |
| св. 9,0 до 50,0 вкл. | 17 | 5 | 8 | 14 | |
| св. 50,0 до 5000 вкл. | 14 | 3,5 | 6 | 10 | |
| Витамин Е | от 25,0 до 240,0 вкл. | 32 | 10 | 15 | 28 |
| св. 240,0 до1500 вкл. | 20 | 5 | 8 | 14 | |
| Витамин D3 | от 0,5 до 50,0 вкл. | 28 | 9 | 14 | 25 |
| св. 50,0 до 100 вкл. | 14 | 4,5 | 7 | 12 |
3. Пробоподготовка
Подготовка проб к измерениям включает следующие этапы:
Для анализа готовят две параллельные пробы.
Блок-схема процедуры пробоподготовки
4. Проведение хроматографического анализа
4.1. Оборудование и условия для проведения ВЭЖХ-анализа градуировочных растворов витаминов A, E и D3 и подготовленной пробы
Для хроматографического определения жирорастворимых витаминов A, E и D3 необходимо использовать градиентную ВЭЖХ-систему с спектрофотометрическим детектором, позволяющим изменение длины волны источника света в процессе анализа, и термостатом колонок.
Для проведения анализа предварительно готовят градуировочные растворы A, E и D3; проводят пробоподготовку; подготавливают к работе прибор.
Оборудование:
Условия:
Градуировку во всем диапазоне измеряемых концентраций проводят не реже 1 раза в месяц, а также при смене колонки и/или защитной колонки, при замене веществ и/или реактивов; после проведения ремонта хроматографа, после длительного простоя хроматографа (2 недели и более), при изменении эффективности хроматографической системы и/или чувствительности детектора.
4.2. Определение количественного содержания витаминов A, E и D3 в пробе
Для получения результата измерений проводят анализ двух параллельных проб, для каждой из которых выполняют по два измерения (получают по две хроматограммы). Массовая концентрация анализируемой i-го компонента (витамина А (ретинола), витамина Е (α-токоферола) и витамина D3 (холекальциферола)) в параллельных пробах, введенных в хроматограф (Ci1) и (Ci2), автоматически рассчитывается системой сбора и обработки хроматографической информации.
Если массовая концентрация пробы, введенной в хроматограф, оказывается больше верхней границы диапазона градуировки (для витамина А – 0,0200 мг/дм3, для витамина Е – 0,1500 г/дм3, для витамина D3 – 0,0150 г/дм3), пробу перед вводом в хроматограф разбавляют спиртом изопропиловым. Коэффициент разбавления учитывают при расчете.
Рассчитывают среднее арифметическое значение массовой концентрации i-го компонента в пробах, введенных в хроматограф (Ci1 и Ci2), по результатам двух измерений для каждой из параллельных проб по формуле
Сiср = ( Сi1 + Сi2 ) / 2
Массовую долю i-го компонента в анализируемой пробе Xi пр, [мг/кг] рассчитывают по формуле:
После сокращений расчётная формула принимает вид:
Коэффициент K1, учитывающий выход реакции гидролиза и степень извлечения витаминов из пробы для различных видов продуктов (эмпирические данные):
| Коэффициент K1 |
Мука, хлеб, макаронные изделия |
Премиксы, БАД, витаминные препараты |
Масложировая продукция |
| Витамин А | 0,90 | 0.98 | 0,90 |
| Витамин Е | 0,70 | 0,98 | 0,65 |
| Витамин D3 | 0,90 | 0,98 | 0,80 |
За результат измерений принимают среднее арифметическое значение массовой доли i-го компонента в двух параллельных пробах.
| Copyright © АО "Аквилон" |
